論文抄録

第118巻第4号

臨床研究

結膜上皮細胞におけるdectin-1およびBAFF発現の検討
吉田 圭, 庄司 純, 石森 秋子, 中島 基宏, 稲田 紀子, 澤 充
日本大学医学部視覚科学系眼科学分野

目 的:結膜上皮細胞におけるdectin-1およびB-cell activating factor belonging to the tumor necrosis factor family(BAFF)発現の部位別,疾患別および培養結膜上皮細胞による検討.
対象と方法:
1.結膜上皮細胞診によるdectin-1およびBAFF発現の検討
対象は,健常対照(健常群)12例12眼,Sjögren症候群(シェーグレン群)6例6眼,春季カタル(春季カタル群)10例10眼である.Impression cytology法で採取した結膜上皮細胞において,蛍光抗体法によるdectin-1蛋白質発現,およびreal-time polymerase chain reaction(real-time PCR)法によるdectin-1 mRNAおよびBAFF mRNA発現の検討を行った.
2.培養結膜上皮細胞によるdectin-1およびBAFF発現の検討
培養結膜上皮細胞をOK-432添加群(添加濃度:0.02,0.1,0.5 KU/ml),lipopolysaccharide(LPS)添加群(添加濃度:80,160,320 μg/ml)および無添加群の7群に分けて培養した後,細胞を回収してdectin-1 mRNAおよびBAFF mRNA発現についてreal-time PCRを用いて検討した.
結 果:
1.結膜上皮細胞診によるdectin-1およびBAFF発現の検討
健常群におけるdectin-1発現の部位別検討では,蛍光抗体法によるdectin-1蛋白質発現およびreal-time PCRによるdectin-1 mRNA発現量はともに部位差がみられなかった.疾患別でのdectin-1 mRNA発現量は,健常群1.5(0.1~4.0)〔中央値(レンジ)〕,シェーグレン群2.6(1.1~4.8),春季カタル群3.6(1.7~16.6)で,健常群と比較して春季カタル群で有意に高値を示した(p<0.01,Kruskal-Wallis H-test).BAFF mRNA発現量も,健常群2.8(0.2~13.8)〔中央値(レンジ)〕,シェーグレン群6.3(2.1~15.1),春季カタル群11.2(3.5~70.8)であり,健常群に対して春季カタル群で有意に高値を示した(p<0.01,Kruskal-Wallis H-test).また,全症例を対象にしたdectin-1 mRNA発現量とBAFF mRNA発現量との間には,有意な相関関係がみられた(r=0.75,p<0.001,Spearmanの順位相関係数).春季カタル重症度別でのdectin-1 mRNA発現量は,軽症群2.8(1.7~3.8)〔中央値(レンジ)〕と比較して中等症·重症群9.2(2.6~16.6)で有意に高値を示した(p<0.05,Mann-Whitney U-test).BAFF mRNA発現量は,軽症群4.3(3.5~11.2)〔中央値(レンジ)〕と比較して中等症·重症群17.4(9.1~70.8)で有意に高値を示した(p<0.05,Mann-Whitney U-test).
2.培養結膜上皮細胞によるdectin-1およびBAFF発現の検討
OK-432刺激による培養結膜上皮細胞でのdectin-1 mRNA発現は,濃度依存的に発現が増加し(p<0.05,Kruskal-Wallis H-test),dectin-1 mRNA発現量とBAFF mRNA発現量との間に有意な相関関係がみられた(r=0.85,p<0.005,Spearman順位相関係数).
結 論:結膜上皮細胞におけるdectin-1発現が証明され,結膜上皮におけるdectin-1およびBAFF発現は,春季カタルなどのアレルギー炎症の病態の重症化に関与している可能性が考えられた.(日眼会誌118:368-377,2014)

キーワード
Dectin-1, 結膜上皮, BAFF, real-time PCR, 蛍光抗体法
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